差速離心法
發表時間： 2023-10-23 09:19:38
作者： 湖南OB视讯科學儀器有限公司
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差速離心法指分步改變離心轉速或向速崎低速離心交替進行，選用大小不向的離心力使具備不同質量、不同沉降係數的微小顆粒(粒子或大分子)從混合的懸浮液中分批沉降而進行分
差速離心法指分步改變離心轉速或向速崎低速離心交替進行，選用大小不向的離心力使具備不同質量、不同沉降係數的微小顆粒(粒子或大分子)從混合的懸浮液中分批沉降而進行分離的力法。該方法適用於在懸浮液中的樣品顆粒之間重量存在較大差別，更準確地說是沉降係數的差別在一個到幾個數量級的混合樣品的分離。重量或S值的差別越大，分離的效果越好。對於差別較小的顆粒，差速離心法就很難得到滿意的分離效果。這種離心方法是通過得到沉澱或得到除去大的顆粒後的上清液來進行分離、提取。該方法又稱差速沉澱法。
差速沉澱離心一般採用角轉子。在離心開始時，所有顆粒都均勻地分佈在整個離心管中，離心期間各種顆粒以不問速度向管底沉降，纖過一定時間，zui重的或S值zui大的顧粒全部沉別管底，得到不合這種顆粒的上清液。將上清液進一步以更高轉速離心一定時間，又對得到次輕的顆粒，逐漸增加離心轉速就可以分步得到不同質量、不同S值的顆粒樣品，達到分離的目的。
但是每次得到的沉澱並不均一，這是由於各種大小和密度的顆粒的離心管中均勻分佈，經一定時間離心後全部zui重的顆粘達到管底時，離心開始時離管底較近處的較輕顆粒也沉到管底而混於該重顆粒之中，所以還要將沉澱再懸浮，以原來的轉速再次離心，獲得的沉澱將更加「純」一些，這樣反覆幾次就可以得到基本上大小均一的「純」樣品。這個過程稱為「洗」沉澱。將每次洗過的上清液合併起來以更向轉速離心，從上清液或沉澱得到分離提純的另一組分。
差速離心常用來分離各種化細胞器從粗提核酸、蛋白質。例如組織勾漿可根據它們的S值大小與具他組分提山來。這種方法將zui初的沉澱反覆地懸浮和離心2—3次就能得到一個相對純的亞細腦組分，但得到的糾分也不是絕對均一，可以進一步用一種連續的液體密度梯度代替均勻的懸浮介質，從而得到一個更好的分離。
